血清的保存與分裝

　　關(guān)于血清的保存條件，這是一個(gè)非常重要且常見(jiàn)的問(wèn)題。正確的保存是保證血清質(zhì)量和細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。
 

　　以下是血清保存條件的詳細(xì)說(shuō)明，主要針對(duì)最常見(jiàn)的胎牛血清，其他類型血清(如小牛血清、馬血清等)也適用類似原則。
 

　　一、血清保存的核心原則：避免反復(fù)凍融
 

　　反復(fù)凍融是損害血清質(zhì)量的最主要因素。它會(huì)導(dǎo)致：
 

　　蛋白質(zhì)變性、沉淀。
 

　　營(yíng)養(yǎng)成分降解。
 

　　生長(zhǎng)因子活性喪失。
 

　　增加沉淀物的形成。
 

　　二、血清的建議存儲(chǔ)溫度與解凍
 

　　1.儲(chǔ)存：建議將血清儲(chǔ)存在-15℃~-20℃。
 

　　Ps:已開(kāi)封血清的保存
 

　　最佳實(shí)踐：分裝！分裝！分裝！
 

　　這是保護(hù)血清活性最有效的方法。收到血清后，在首次解凍后立即進(jìn)行無(wú)菌分裝。
 

　　分裝體積：根據(jù)您每次實(shí)驗(yàn)的常用量(如 50mL/管)，確保每管能在短時(shí)間內(nèi)用完。
 

　　儲(chǔ)存：將分裝好的血清立即放回-20°C或-80°C冷凍。使用時(shí)取出一管，其余血清仍處于未解凍狀態(tài)。
 

　　2. 解凍：不建議于4℃過(guò)夜解凍，也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍，因?yàn)槿粞鍥](méi)有混勻，底部的蛋白會(huì)變性形成沉淀。
 

　　血清解凍的方法(三步法)
 

　　三、 可能出現(xiàn)的問(wèn)題：血清沉淀物
 

　　血清在儲(chǔ)存和解凍過(guò)程中出現(xiàn)沉淀是常見(jiàn)現(xiàn)象，主要有：
 

　　脂蛋白聚合物：顯微鏡下可見(jiàn)的小黑點(diǎn)，通常不影響細(xì)胞生長(zhǎng)。
 

　　磷酸鈣結(jié)晶：外觀像白色碎片或絮狀物，可能影響細(xì)胞生長(zhǎng)。
 

　　纖維蛋白：肉眼可見(jiàn)的絮狀沉淀。
 

　　如果沉淀量不多，無(wú)需特別處理。如果量多，建議過(guò)濾后使用。
 

　　四、總結(jié)：最佳操作流程
 

　　收貨檢查：收到血清后，檢查包裝是否完好，立即根據(jù)計(jì)劃儲(chǔ)存于-20°C。
 

　　首次處理：使用時(shí)，從冰箱取出，置于4°C 過(guò)夜解凍。
 

　　立即分裝：解凍后，在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行無(wú)菌分裝至多個(gè)小體積無(wú)菌離心管中。

 

　　冷凍儲(chǔ)存：將分裝管立即放回-20°C冷凍。
 

　　日常使用：每次實(shí)驗(yàn)取出一管分裝血清，在4°C解凍或室溫水浴快速解凍后使用。已解凍的血清如在1個(gè)月內(nèi)不能用完，建議丟棄或重新過(guò)濾后4°C短期保存。
 

　　遵循以上保存條件，可以最大限度地維持血清的生物學(xué)活性，確保您的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠。